Correction TL: Coproculture

CORRECTION TL COPROCULTURE

1 Donner la définition d’une coproculture

l’ensemencement pratiqué à partir des fèces (selles) dans le but d’isoler et d’identifier les agents pathogènes responsables d’une infection digestive

BUT : rechercher parmi la flore normale :

- Soit des bactéries normalement absentes et pathogènes

- Soit des espèces bactérienne anormalement dominante

- Soit des bactéries entero pathogènes chez un porteur sain ( métier alimentation)

- Enquête épidémiologique

2 Donner les critères à noter lors de l’examen direct Etat frais d’une selle

Noter la présence de :

- Leucocytes

- Hématies

- Mobilité des bactéries (vibrion par exemple

- De mucus

- De levures

- Préciser l’abondance des microorganismes

3 Donner l’objectif de la coloration au SOUDAN III d’une selle

- but : renseigne sur la digestion des lipides

Noter l’abondance des ( 0 à3+)

- globules graisseux : structure réfringente et colorés en rose orangé : graisse neutres

- Après chauffage au bec bunsen de la préparation les constituants lipidiques sont colorés en rouge orangé :acides gras ou savon

Interprétation :

- Présence normale de globules graisseux

- Si grande quantité de graisse : les graisses n’ont pas été hydrolysées par les lipases pancréatiques et qu’il existe un déficit de la digestion à ce niveau

Si on observe des globules gras à chaud seulement : mauvaise absorption des acides gras au niveau de l’intestin grêle

4 Donner l’objectif de la coloration au lugol d’une selle

- But : coloration des grains d’amidon

- Grain d’amidon : coloration en violet, rose violacé ou brun . Structure réfringents , soit intracellulaire , soit extracellulaire sous forme de hile, cercles concentrique

si abondance des grain d’amidon : carence du pancréas exocrine ou accélération du transit intestinal

- Présence de fibre musculaires mal digérées :en cas d’insuffisance du pancréas exocrine : fibrefibres longues, avec striation, avec contour anguleux

- Cellulose : cellules végétales volumineuses, transparentes, souvent plissées. SI abondance : transit accéléré

- Oxalate de calcium : observation en cas d’insuffisance gastrique car ces sels sont solubilisé au niveau de l’estomac. Sa présence est inconstant et dépend de l’alimentation ( haricots, épinards, oseille)

5 Donner l’objectif de la coloration de GRAM d’une selle

- Évaluer le pourcentage des bactéries à Gram (+) et les Gram (-)

- Faire une recherche des aspects caractéristiques à certaines bactéries (Campylobacter, vibrion…)

Commentaires :

A l’état normal : les Gram + et les Gram- sont retrouvées en quantités à peu près équivalentes, cependant des variations assez importante existe en fonction du régime alimentaire

6 Donner l’objectif de la coloration au bleu de méthylène ou MGG.

but : recherche de leucocytes fécaux. Signe d’un processus invasif

recherche d’hématies et de levures

- Mise en évidence dans 30 à 40 % des diarrhées

- Forte réaction leucocytaire pour :Shigella et campylobacter

Pas de leucocytes présents pour : diarrhées à germes entérotoxiques

7 Donner la diagramme de recherche de Salmonella et Shigella dans une selle

Milieux d’enrichissement : En même temps, pour les Salmonelles, un enrichissement doit être effectué dans un milieu liquide contenant des inhibiteurs des autres entérobactéries.

Les deux milieux les plus utilisés sont le milieu de Muller Kauffmann qui contient des sels biliaires, du tétrathionate et du vert brillant, ou le milieu de Leifson qui contient du sélénite de sodium.

Après 24 heures, le contenu de ce milieu est repiqué sur gélose Hektoen

Milieux d’isolements sélectifs : SS – Hectoen – DCL – VBRP ( gélose au vert brillant et au rouge de phénol)-

Milieux chromogènes : Rambach –SMID ( biomérieux)

L'incubation de tous les milieux se fait à 37°C pendant 18 à 24 heures

Repérage des colonies suspectes :

SS et DCL : colonies lactose – et H2S +/- : incolore , avec sans centre noir ( attention Proteus rettgeri, Providencia ont le

...