Dosage Glucose/Créatinine/Protéine TP rein
Compte rendu : Dosage Glucose/Créatinine/Protéine TP rein. Recherche parmi 298 000+ dissertationsPar Lorja S • 13 Mars 2022 • Compte rendu • 548 Mots (3 Pages) • 907 Vues
Préparation TP rein
1/ Dosage du glucose
- Pour ce dosage, nous aurons besoin de 4 tubes de dilution, 3 tubes pour les 3 échantillons, 3 tubes pour diluer les urines et 1 tube pour le blanc, ce qui fait 11 tubes au total.
- On utilisera 100 µL de solution standard ainsi que 8000 µL de réactif GOD.
- Notre gamme de dilution sera composée de 4 tubes, contenant 10µL, 20µL, 30µL puis 40µL de solution standard, qu’on complète d’eau jusqu’à 50 µL.
pipetage\ tube | 1 | 2 | 3 | 4 |
concentration en solution standard | 0.6 g/L | 1.2 g/L | 1.8 g/L | 2.4 g/L |
Vol. solution standard | 10 µL | 20 µL | 30 µL | 40 µL |
H2O | 40 µL | 30 µL | 20 µL | 10 µL |
Nous allons aussi diluer les urines au ½, comme nous en possédons environ 1 mL, il faudra mettre 500 µL d’une urine combiné à 500 µL d’H2O dans un tube, et faire pareil pour les 2 autres tubes d’urines .
- - Commencer par préparer la gamme étalon.
- Préparer les solutions indiquées:
Blanc | étalon(tubes 1 à 4) | échantillons d’urine A,B et C | |
Eau distillée | 10 µL | - | - |
Dilution étalon | - | 10 µL | - |
échantillons | - | - | 10 µL |
Réactif GOD | 1000 µL | 1000 µL | 1000 µL |
- Mélanger et laisser incuber 20 min à 20-25°C.
- Lire l’absorbance à 500 nm contre le blanc réactif avant 60 min.
2/ Dosage des protéines
- Pour le dosage des protéines, il faudra 5 tubes pour la courbe étalon, ainsi que 5 de plus comme on va transvaser 30 µL, ainsi que 3 tubes de plus pour les échantillons d’urine, ce qui fait 13 tubes en tout.
- On utilisera 8000 µL de réactif Bradford ainsi que 300 µL de BSA.
- Le kit doit être composé d’une gamme de 5 dilutions :
dilutions | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
concentration en BSA | 0.28 mg/mL | 0.56 mg/mL | 0.84 mg/mL | 1.12 mg/mL | 1.4 mg/mL |
Vol. de BSA | 20 µL | 40 µL | 60 µL | 80 µL | 100 µL |
eau distillée | 80 µL | 60 µL | 40 µL | 20 µL | 0 µL |
- - Mélanger délicatement le réactif Bradford et l’amener à température ambiante.
- Réaliser la gamme étalon mentionnée plus tôt .
- Prélever 30 µL de la gamme étalon ainsi que des échantillons d’urines et les mettre dans de nouveaux tubes, auxquels on ajoute dans chaque tube 1 mL de réactif de Bradford (on obtient 8 tubes de 1.03 mL).
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