Dosage du Glucose - Fonctionnement du rein

T ST2S

Dosage du glucose

(fonctionnement du rein)

Matériel :

• 1 µPipette P1000 + 8 cônes (Biochimie) + poubelle (=verre à pied)
• 2 Fioles 10 mL (Biochimie)
• 1 Béchers de 25 mL noté Cmère
• 1 Pipette graduée 10mL
• Parafilm pour les µCuves
• 1 Spectrophotomètre Jenway : λ max 505nm [pic 1]
• 8 µCuves sur support (Biochimie)
• 1 Portoir avec 3 tubes Eppendorf (Biochimie) (150µL/tube) :

• 1 noté S (solution de glucose à 0,25 g/L)
• 1 noté UP (solution de glucose à 0,25 g/L)
• 1 noté UD (eau distillée)

Prof :

• 4 Béchers 100 mL noté 1, 2, 3, 4 (pour regrouper toutes les prépas élèves avant qu’ils se servent des solutions) + Psipette
• 4 tubes Eppendorf / Binôme noté 1, 2, 3, 4 sur portoir[pic 2][pic 3]
• 8mL ou 12mL / suivant les binômes (          ou        )de Solution de glucose à 0,5 g/L noté Cmère
• 2 postes :

GOD (8mL / Binôme) + Multipette réglé sur 2 avec embout 1grad=500µL (distribue 1mL doucement) + Bécher 50mL + Erlen 250mL (=support multipette)

[pic 4][pic 5]

Remarque : les binômes préparent soit les solutions 1 & 3 ou 2 & 4.[pic 6]

Cliquer ici

Travaux pratiques

Fonctionnement du rein : dosage du glucose

[pic 7]

Un dosage permet de déterminer la concentration d’une espèce chimique dans une solution. Dans un dosage par étalonnage, on mesure une grandeur physique que l’on compare avec des valeurs connues sur la courbe d’étalonnage

[pic 8][pic 9]

[pic 10]

Principe d’un dosage par étalonnage par spectrophotométrie

Voir Capsule « dosage par étalonnage » https://www.youtube.com/watch?v=JwMzkHTnS84

Quel est l'intérêt d'un dosage ?

Un dosage permet de déterminer la concentration d'une espèce chimique dans une solution

Quelles sont les 3 étapes d’un dosage par spectrophotométrie ?

 1 / Préparer une gamme de solutions ………….……. par dilution d’une solution mère de concentration …………..…

 2 / Mesurer l’………………..…… de chaque solution fille et de la solution inconnue avec un …………………………..….….

 3 / Tracer la courbe d’……………………..… A = f(C) de l’absorbance en fonction de la concentration et déterminer par lecture …………………..…….. la concentration de la solution …………………………….

1/ Contexte 

Les reins sont des organes vitaux qui assurent deux grandes fonctions : l'épuration du sang et la sécrétion d'hormones.

La fonction première des reins est d’éliminer les déchets toxiques produits par le fonctionnement normal de l’organisme et transportés par le sang. Ces substances sont inutiles à l'organisme et sont toxiques si elles ne sont pas éliminées.

Cette fonction est permise par filtration du sang.

Les molécules essentielles à l'organisme filtrées au niveau des reins ne doivent pas être éliminées avec l'urine.

Dans cette séance, on se propose de doser le glucose dans le sang, dans l'urine en formation (urine primitive) et dans l'urine excrétée (urine définitive).

2/ Protocole expérimental

2-1/ Préparation des solutions étalons de glucose

La préparation des solutions étalons à partir d’une solution mère de glucose de concentration en masse Cmère = 2 g.L-1 s'effectuera selon le tableau suivant :

[pic 11][pic 12]

• Rappeler les 3 étapes du protocole de préparation d'une solution par dilution en précisant la verrerie nécessaire.

• Réaliser la préparation de deux solutions étalon (numéro  .....   et ….).

• A partir de la formule de la dilution : Cmère x Vmère = Cfille x Vfille , calculer les concentrations en masse de glucose de chacune des solutions filles et compléter le tableau. On détaillera un seul calcul.

2-2/ Réalisation de la gamme d'étalonnage et mesure d'absorbance

• Réaliser en microcuves de spectrophotomètre la gamme d'étalonnage suivante : 

• Boucher les microcuves avec du parafilm, agiter par retournement.
• Laisser agir 30 min à température ambiante.
• Essuyer l’extérieur de vos microcuves avec du papier optique.
• Régler le 0 du spectrophotomètre grâce à la solution « blanc » (cuve 0).
• Mesurer l'absorbance avec le spectrophotomètre de chaque solution et compléter le tableau.

3/ Exploitation des résultats

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