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TP Antibiogramme

Compte rendu : TP Antibiogramme. Recherche parmi 296 000+ dissertations

Par   •  12 Septembre 2022  •  Compte rendu  •  763 Mots (4 Pages)  •  795 Vues

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Compte rendu

TP Antibiogramme

Objectif: 

Ce TP avait pour objectif de nous présenter l’antibiogramme qui est un test in vitro de sensibilité d’un germe à des antibiotiques par diffusion sur milieux solides. Ainsi nous avons dû déterminer l’antibiotique le plus adapté à une infection bactérienne de E.coli et de Bacillus Megaterium et exploiter les résultats pour la surveillance des résistances bactériennes aux antibiotiques.

Principe : 

Des disques imprégnés d’agents antimicrobiens (les antibiotiques) sont placés sur une gélose de façon régulière. Après 24-30 ou 48h d’incubation, on observe alors le diamètre de la zone d’inhibition autour des disques correspondant à une zone circulaire sans croissance bactérienne.

Par la suite, on mesurera leur diamètre pour obtenir un rapport qualitatif du type de bactérie, sensible, intermédiaire ou résistante.

Matériel :

Sécurité :

  • 2 boîtes de pétri avec 2 souches : E.coli et Bacillus Megaterium
  • Pipettes pasteurs stériles
  • Etuve à 37°C
  • Bécher poubelle
  • Pince
  • Bec bunsen
  • Hotte aspirante
  • 4x2 disques d'antibiotiques : tétracycline (T); acide nalilixique (Na); penicillium (PG); ampicilline (AP)
  • EPI : blouse
  • Désinfecter paillasse et mains
  • Écarter les sources de contamination
  • Manipuler sous hotte ou autour du bec bunsen de façon à avoir un environnement stérile
  • Désinfecter matériel

Méthode: 

Manipuler sous hotte ou près d’un bec bunsen afin de garantir la stérilité de nos préparations.

  • Ensemencement des boîtes de pétri avec la souche E.coli :
  • Prélever 1 ml avec une pipette pasteur, la souche E.coli et la déverser dans une première boîte de pétri
  • Répartir le liquide de façon équitable sur toute la boîte en la faisant basculer
  • Verser dans le bécher poubelle de javel l’excédent
  • Laisser sécher pendant 25 min sous hotte
  • Déposer à l’aide d’une pince stérile les 4 disques d’antibiotiques de façon régulière sans les toucher
  • Mettre la boîte à l’étuve 37°C pendant 24-30h ou 48h

[pic 1]

Manipuler sous hotte ou près d’un bec bunsen afin de garantir la stérilité de nos préparations.

  • Ensemencement des boîtes de pétri avec la souche  B.megatherium :
  • Prélever 1 ml avec une pipette pasteur de B.megaterium et la déverser dans la boîte E.coli
  • Répartir le liquide de façon équitable sur toute la boîte
  • Verser dans le bécher poubelle l’excédent
  • Laisser sécher pendant 25 min en condition stérile
  • Déposer à l’aide d’une pince stérile les 4 disques d’antibiotiques de façon régulière
  • Mettre la boîte à l’étuve 37°C pendant 24-30h ou 48h

Résultats :

Types d’antibiotiques

Diamètre du cercle d’inhibition E.coli

Correspondance taux de la CMI (mm)

Diamètre du cercle d’inhibition B.megatherium

Correspondance taux de la CMI

Tetracycline 30µg (T)

2,6 cm

S≥ 18;15 < R

CMI = 26 mm

Sensible

3,2 cm

S≥ 23;20 < R

CMI = 32 mm

Résistante

Acide nadilixique 30µg (NA)

2,4 cm

S≥ 19;14 < R

CMI = 26 mm

Résistante

1,6 cm

S≥ 19;14 < R

CMI = 16 mm

Intermédiaire

Ampicilline 10µg (AD)

2 cm

S≥ 10;8 < R

CMI = 2 mm

Sensible

2,6 cm

S≥ 14;14 < R

CMI = 26 mm

Résistante

Pénicilline G 10 unités (PG)

0,9 cm

S≥ 18;18 < R

CMI = 9 mm

Sensible

3 cm

S≥ 26;26 < R

CMI = 30 mm

Résistante

...

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