TP Antibiogramme
Compte rendu : TP Antibiogramme. Recherche parmi 303 000+ dissertationsPar Marina Lapeyre • 12 Septembre 2022 • Compte rendu • 763 Mots (4 Pages) • 1 336 Vues
Compte rendu
TP Antibiogramme
Objectif:
Ce TP avait pour objectif de nous présenter l’antibiogramme qui est un test in vitro de sensibilité d’un germe à des antibiotiques par diffusion sur milieux solides. Ainsi nous avons dû déterminer l’antibiotique le plus adapté à une infection bactérienne de E.coli et de Bacillus Megaterium et exploiter les résultats pour la surveillance des résistances bactériennes aux antibiotiques.
Principe :
Des disques imprégnés d’agents antimicrobiens (les antibiotiques) sont placés sur une gélose de façon régulière. Après 24-30 ou 48h d’incubation, on observe alors le diamètre de la zone d’inhibition autour des disques correspondant à une zone circulaire sans croissance bactérienne.
Par la suite, on mesurera leur diamètre pour obtenir un rapport qualitatif du type de bactérie, sensible, intermédiaire ou résistante.
Matériel : | Sécurité : |
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Méthode:
Manipuler sous hotte ou près d’un bec bunsen afin de garantir la stérilité de nos préparations.
- Ensemencement des boîtes de pétri avec la souche E.coli :
- Prélever 1 ml avec une pipette pasteur, la souche E.coli et la déverser dans une première boîte de pétri
- Répartir le liquide de façon équitable sur toute la boîte en la faisant basculer
- Verser dans le bécher poubelle de javel l’excédent
- Laisser sécher pendant 25 min sous hotte
- Déposer à l’aide d’une pince stérile les 4 disques d’antibiotiques de façon régulière sans les toucher
- Mettre la boîte à l’étuve 37°C pendant 24-30h ou 48h
[pic 1]
Manipuler sous hotte ou près d’un bec bunsen afin de garantir la stérilité de nos préparations.
- Ensemencement des boîtes de pétri avec la souche B.megatherium :
- Prélever 1 ml avec une pipette pasteur de B.megaterium et la déverser dans la boîte E.coli
- Répartir le liquide de façon équitable sur toute la boîte
- Verser dans le bécher poubelle l’excédent
- Laisser sécher pendant 25 min en condition stérile
- Déposer à l’aide d’une pince stérile les 4 disques d’antibiotiques de façon régulière
- Mettre la boîte à l’étuve 37°C pendant 24-30h ou 48h
Résultats :
Types d’antibiotiques | Diamètre du cercle d’inhibition E.coli | Correspondance taux de la CMI (mm) | Diamètre du cercle d’inhibition B.megatherium | Correspondance taux de la CMI |
Tetracycline 30µg (T) | 2,6 cm | S≥ 18;15 < R CMI = 26 mm Sensible | 3,2 cm | S≥ 23;20 < R CMI = 32 mm Résistante |
Acide nadilixique 30µg (NA) | 2,4 cm | S≥ 19;14 < R CMI = 26 mm Résistante | 1,6 cm | S≥ 19;14 < R CMI = 16 mm Intermédiaire |
Ampicilline 10µg (AD) | 2 cm | S≥ 10;8 < R CMI = 2 mm Sensible | 2,6 cm | S≥ 14;14 < R CMI = 26 mm Résistante |
Pénicilline G 10 unités (PG) | 0,9 cm | S≥ 18;18 < R CMI = 9 mm Sensible | 3 cm | S≥ 26;26 < R CMI = 30 mm Résistante |
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