La chromatographie
Cours : La chromatographie. Recherche parmi 298 000+ dissertationsPar dissertation • 20 Décembre 2012 • Cours • 277 Mots (2 Pages) • 1 015 Vues
1. La chromatographie en phase liquide
La chromatographie permet la séparation ou la purification d'un ou de plusieurs composés d'un mélange en vue de
leur identification et de leur quantification.
La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n'étaient auparavant pas possible avec
les techniques sur couche mince ou en phase gazeuse.
A l'origine la chromatographie en phase liquide se faisait sur des colonnes en verre. Le liquide traversait la phase
stationnaire par gravité ou sous faible pression. Puis pour augmenter le débit, des manipulations ont été réalisées
sous pression plus forte. C'est ce que l'on a appelér la chromatographie liquide sous haute pression (HPLC). Très
rapidement le P de pression est devenu le P de performance lorsque l'on a optimisé la technique (diminution de la
taille de particules de la phase stationnaire, régularité de cette phase...).
Principe :
Les composés à séparer (solutés) sont mis en solution dans un solvant. Ce mélange est introduit dans la phase
mobile liquide (éluant). Suivant la nature des molécules, elles interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire
dans un tube appelé colonne chromatographique.
La phase mobile poussée par une pompe sous haute pression, parcourt le système chromatographique.
Le mélange à analyser est injecté puis transporté au travers du système chromatographique. Les composés en
solution se répartissent alors suivant leur affinité entre la phase mobile et la phase stationnaire.
En sortie de colonne grâce à un détecteur approprié les différents solutés sont caractérisés par un pic. L'ensemble
des pics enregistrés est appelé chromatogramme.
2. Notions fondamentales
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La phase stationnaire est un support plus ou moins poreux recouvert d'un gel (liquide greffé) qui a les propriétés
désirées pour retenir les molécules de solutés.
La phase mobile ou éluant est un liquide qui entraîne les solutés à travers la colonne.
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