Chromatographie Sur Une Couche Mince

Introduction : Le domaine de la Santé nécessite un apport conséquent en espèces chimiques notamment pour

formuler les médicaments. C’est pourquoi, on cherche depuis tout temps à extraite celles que la nature peut nous

amener. Mais une fois cette extraction effectuée, comment savoir si on a extrait telle ou telle molécule ? Il faut procéder

à une identification :

- il faut d’abord bien séparer l’espèce chimique présente dans l’extrait,

- puis, on procède à sa caractérisation en recherchant ses caractéristiques physiques qui constituent son « ID ».

Nous avons déjà vu que des tests caractéristiques chimiques simples pouvaient nous fournir des renseignements mais

ils apparaissent bien insuffisants par rapport à l’ensemble des espèces chimiques qui peuvent exister dans la nature et

réagit de la même façon au test pratiqué. Ex : Les ions zinc Zn2+ & alu Al3+ forment un précipité blanc avec la soude

Il a donc fallu mettre au point de nouvelles techniques d’identification des espèces chimiques. Et, dans ce cours, nous

allons justement étudier un procédé qui permet une bonne séparation et identification avant de répertorier ≠

caractéristiques physiques et chimiques permettant l’identification d’une espèce chimique.

I. La chromatographie.

1. Définition.

Le mot vient de khrôma, « couleur ». A l’origine, c’était une technique de séparation de substances de séparation

de substances colorées, mais elle est aujourd’hui utilisée pour tout type de mélange.

La chromatographie est une méthode physique de séparation et d’identification

des espèces chimiques présentes dans un mélange.

But : * Elle permet de vérifier si une substance chimique est pure ou non. Elle permet aussi d’analyser et de

reconnaître les constituants d’un mélange par comparaison avec d’autres échantillons connus.

* Il existe ≠ chromato (sur colonne / par exclusion / CPV …) mais nous nous limiterons aux chromato sur papier et CCM.

2. Principe.

* Pour réaliser une chromatographie, on utilise :

- une phase fixe : papier ou plaque de silice sur laquelle on dépose les substances à analyser.

- une phase mobile appelée éluant : solvant ou un mélange de solvants qui va migrer le long

de la phase fixe en entraînant les différentes substances que l’on a déposées.

* Les substances à analyser sont dissoutes (ou diluées si elles sont déjà liquides) dans l’éluant. Puis elles sont

déposées sur la ligne de dépôt au bas de la phase fixe.

* L’élution : - l’éluant migre lentement le long de la phase fixe par capillarité (cf l’eau qui monte dans un tube fin),

- lorsque l’éluant arrive au niveau de la ligne de dépôt, les substances à analyser sont entraînées

dans la migration. Plus l’espèce chimique est soluble dans l’éluant, plus elle sera entraînée facilement

et donc migrera plus vers le haut de la phase fixe. Inversement, une espèce chimique peu soluble dans

l’éluant restera au bas de la phase fixe.

=> Csq : Le choix de l’éluant apparaît donc fondamental selon sa capacité

à solubiliser plus ou moins une espèce chimique.

Exp : CCM coloré sur papier + plaque de silice

Seconde_thème 2_La Santé chapitre 2_Les médicaments

2/3

3. Le chromatogramme.

A la fin de l’élution, on obtient un ensemble

de taches correspondant aux espèces séparées à des hauteurs

différentes. On parle de chromatogramme.

Rq : * Si les espèces analysées sont incolores, il faut les

rendre visible, les révéler, en utilisant de la lumière UV ou

en utilisant un réactif coloré comme le permanganate de

potassium.

4. Interprétation.

Chaque tache du chromatogramme représente une espèce chimique présente initialement dans

l’échantillon analysé. La lecture se fait en deux temps :

- la lecture verticale : si l’échantillon analysé ne présente qu’une seule

tache alors il est composé d’une seule espèce chimique qui est donc pure,

- la lecture horizontale : pour identifier l’espèce chimique correspondant à

une tache, on compare la hauteur atteinte par rapport à celle de substances de référence. Si deux taches sont à

la même hauteur, alors elles correspondent à la même espèce chimique.

Rq : * On peut aussi calculer le rapport frontal Rf pour chaque tache observée :

 =







 

è









 é 

=

...