Croissance Bactérienne

Compte rendu TP Enzymologie , Respiration Intro: Schema CR cour. La chaine respiratoire transporte les electrons et les protons de NADH et FADH2 vers l'oxygène, qui est l'accepteur final de la chaine respiratoire, à travers différentes complexes. C'est un transport progréssif par des reactions d'oxydo-réductions au seins de complexes fixes ou mobiles. Ls complexes I a V sont des complexes fixes, multiprotéiques, transmenbranaires et il y a 2 transporteur mobile: UQ et cyt C. Les électrons du NADH passe dans le complexe I vers UQ puis III, Cyto C pour rriver au complexe IV. Les électrons du FADH2 partent du complexe II pour aller vers UQ puis comlexe III , cyt C et finissent dans le complexe IV. But: Au cour de ce TP nous avons étudiées le fonctionnement de la chaine respiratoire de mitochondrie de foie de rat en mesurant l'évolution de la concentration en oxygène du milieu en fonction du temps. Principe: Pour faire nos mesures nous avons utilisé une élctrode recouverte d'une menbraine teflon perméable a l'oxygène. Un courant élctrique est produit par l'oxygène dissous ans le milieu, qui a difusé et arrive reduit sur la cathode. A savoir que l'intensité du courant est proportionnelle a la quantité d'oxygène dissoute dans le milieu. Au dessus de l'electrode se trouve une chambre de mesure thermostatéedans lequel on y met le tampon de respiration ainsi que les mitochondrie. Cette chambre est fermée par un piston munit d'un fin canal nous permettant l'ajout de différents substrat et effecteur tout au long de l'experience. Pour comprendre le fonctionnement de la chaine respiratoire nous avons fait varier les subtrats du milieu contennt les mitochondrieS, ainsi on a pour voir l'impact de ces changements sur la courbe de l'oxygraphe et donc sur la chaine respiratoire. En fonctions de la variation de la courbe de l'oxygraphe on a put determiner l'inhibition ou l'activation des différents substrats ou drogues sur la chaine respiratoire. Les substrats et drogues utilisés au cour de cette expérience ont un impact su la chaine respiratoire a des endroits différents avec des conséquence différentes sur celle-ci. Certains inhibent le fonctoinnement de la chaine respiratoire tandis que d'autre l'active.

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