LE CYTOSQUEULETTE

LE CYTOSQUELETTE

Le cytosquelette est dur à représenter car il est constitué de filaments très fins qui passent de part et d’autre du cytoplasme. Il permet plusieurs actions :

• Déplacement
• Mouvements = migration cellulaire
• Adaptation de sa forme à l’environnement
• Organisation de la position des organites + trafic des vésicules

Il aide la membrane à supporter le gros volume du cytoplasme.
Chez les animaux, eucaryotes : cytosquelette.

Le cytosquelette est très dynamique : il s’organise et se désorganise à la guise de la cellule.
C’est le squelette osseux mais aussi les muscles de la cellule : certains filaments sont contractiles (déplacement de la cellule, nécessaire à nos muscles constitués de cytosquelette → actine).
On trouve des filaments d’actine dans aussi dans les cellules non musculaires (cicatrisation)

Le cytosquelette est une des clés de notre viabilité : filaments nécessaires aux spz pour se déplacer.

Mouvement des cellules en culture grâce au cytosquelette fait des filaments de composition différente.

• Mise en évidence du cytosquelette : Technique sur la cellule entière

• MOF (microscopie à fluorescence) : on entube avec des AC dirigés contre les protéines (anti-actine par exemple). Marquage des AC avec une molécules fluorescente :

• Actine : marquage avec de la fluorescéine (vert)
• Kératine : rhodamine
• Tubuline : rhodamine

• MET (microscopie électronique à transmission) : Infos plus précises = purifier les faisceaux au préalable et mesure de diamètre.

1. Filaments d’actine ou microfilament MF

1. Structure et propriétés

7 nm de diamètre. 2 chaînes torsadées de monomères d’actine forment le filament.

• Expérience in-vitro pour comprendre l’in-vivo :

Monomères libres à haute tension + ATP (pour polymérisation + ions, calcium à 37°).
Associé au filament = F ; libre = G

Les monomères s’associent côte à côte, toujours dans le MEME SENS, une extrémité C terminale s’associe avec une extrémité N terminale → polarité structurale du filament d’actine, 2 extrémités ≠.

• Polymérisation : aux 2 extrémités, vitesse plus importante à l’extrémité + (meilleure affinité)
• Dépolymérisation : plus rapide à l’extrémité –

• Etape et cinétique

1. Nucléation (latence, long) : temps nécessaire aux 1ers monomères pour s’associer et former l’actine

1. Elongation : polymérisation rapide tant que [G] > [F]

1. Equilibre : [G] = [F] → concentration critique.
   Le filament arrête de grandir, il devient constant mais perdure des phénomènes de polymérisation et de dépolymérisation aux 2 extrémités donc V polymérisation = V dépolymérisation

Quand le monomère s’associe, il fixe de l’ATP. A ce moment, il devient actine F ATP (lié à l’ATP). Quand il s’est associé, hydrolyse de l’ATP en ADP, faite par le monomère (activité ATPase intrinsèque), le monomère passe sous sa forme actine F ADP. Son affinité est diminuée et il va essayer de quitter le filament dès qu’il en aura l’occasion (quand il arrivera à l’autre extrémité du filament). Tapis roulant.[pic 1]

  [pic 2]       

L’hydrolyse de l’ATP favorise la dépolymérisation.

En fonction de la source nutritive, les filaments dirigent la cellule (réaction au stimulus externe).
La façon la plus simple pour la cellule est de réutiliser ses filaments d’actine : les filaments polymérisés vers la mauvaise direction se dépolymérisent et se réforment de l’autre côté. La cellule gagne en temps et en énergie en ne produisant pas d’autres sous unités par transcription et traduction.

• Cytochalasine B : inhibition de la polymérisation par sa fixation à l’extrémité +.
                                Son extrémité – à tendance à dépolymériser

• Phalloïdine : favorise la polymérisation. Fixation sur les filaments déjà polymérisés + stabilisation
  

1. Protéines associées à l’actine

1. Protéines de rétention

Protéines de rétention des monomères d’actine G. Il y a beaucoup plus de molécules libres.

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